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【摘要】 目的 分析HBeAg和抗-HBe雙陽性的原因。方法 初篩試驗用一步法檢測。復核試驗HBeAg仍用一步法和微粒子酶免分析法，抗-HBe用二步法和微粒子酶免分析法。結果 63份HBeAg和抗-HBe雙陽性標本經復核：18份HBeAg陰性，45份抗-HBe陰性。結論 “e”系統雙陽多為操作誤差和一步法造成，必需進行復核。 關鍵詞 乙型肝炎病毒 酶免檢測 復核 乙型肝炎病毒HBeAg陽性，表明病毒復制活躍、傳染性強，與HBsAg同時陽性發生肝癌的危險系數增加60倍，抗-HBe陽性說明病毒復制減少，傳染性弱。近年來，普遍使用ELISA一步法，在工作中遇到HBeAg和抗-HBe雙陽性的少見模式，為了分析這一現象，筆者進行了研究，現報告如下。 1 材料與方法 1.1 標本來源 本院門診和住院患者1910例，其中63例初篩模式為HBsAg、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc4項陽性。 1.2 試劑和儀器 （1）ELISA試劑盒、HBeAg和抗-HBe為上海科華生物技術有限公司產品，批號分別為：20040316、20040516，酶標儀MK-2型、洗板機均為芬蘭雷索公司產品。HBeAg樣品吸光度值/臨界值（S/N）≥2.1判陽性，抗-HBe以抑制率>50%判陽性。（2）微粒子酶免分析（MEIA），使用美國雅培公司試劑和美國AXSYM全自動酶免發光分析系統。抗-HBe采用競爭法，以樣本熒光速率值與臨界熒光速率值之比（S/N）≤1.0判陽性。 1.3 方法 （1）初篩：一步法，嚴格按說明書操作，每加5份血清加入酶標抗體。分別檢測HBeAg、抗-HBe.（2）復核：溶血標本重抽血，脂法患者禁脂3天后抽血；血塊收縮不良，分離不完全標本，經3000r/min10～15min的離心。HBeAg用一步法和微粒子酶免分析。抗-HBe用改進二步法和微粒子酶免分析法，改進再二步法為先加入50μl血清37℃水浴30min，洗滌3次，加酶標抗體37℃水浴30min，再嚴格按說明書操作。 2 結果 初篩63份HBeAg和抗-HBe雙陽血清。經復核：18份HBeAg陰性，抗-HBe仍陽性，45份抗-HBe陰性，HBeAg仍陽性。18份HBeAg陰性標本為溶血和分離不完全標本，初篩與復檢吸光度（A值）比較明顯下降，差異有非常顯著性（P<0.001），見表1.45份抗-HBe復核陰性標本中，一步法與改進2步法吸光度（A值）比較，吸光度值上升，二者差異有非常顯著性（P<0.001），見表2. 表1 HBeAg初篩與復檢吸光度值比較（略） 表2 3種方法測定血清抗-HBe水平比較（略） 3 討論 有學者提出HBeAg和抗-HBe雙陽是HBeAg向抗HBe轉化的過渡階段 ［1］ .本次試驗與以上理論不完全相符，雙陽性結果是假陽性所致，可能的原因為：溶血標本釋放大量過氧化物酶活性的血紅蛋白，產生干擾。血塊收縮不良，分離不徹底，血清中混有過氧化物酶成分，對HBeAg產生正干擾 ［2］ .脂濁致抗-HBe干擾主要考慮乳糜微粒引起，它造成血清黏度增大的運動速度減慢或產生屏蔽效應，抗原抗體結合幾率下降，最終顯色降低，產生假陽性。一步法對抗-HBe易產生前帶現象，若血清中有大量HBeAg，使固相HBeAb-HBeAg-HBeAb-HRP生成減少，顯色下降產生假陽性。二步法的第一步洗滌洗掉多余HBeAg，可消除有效的假陽性。一步法若加入血清放置時間過長，再加酶標抗體也會產生抗-HBe假陽性 ［3］ .二步法試驗有3份抗-HBe仍為陽性，限于條件有限未能研究，可能是抗-HBe和抗-HBc互相干擾所致，或者是AFP、RF、補體、自身抗體、抗大腸桿菌抗體等的干擾［4］ . 綜上所述，HBeAg和抗-HBe雙陽多為操作不規范和一步法影響因素造成。工作中可用一步法復核HBeAg，改進2步法復核抗-HBe，抗-HBe仍陽性采用美國雅培公司MEIA法復核可有效消除假陽性的產生。 參考文獻 1 朱忠勇。實用醫學檢驗學。北京：人民軍醫出版社，1992，900-901. 2 趙友云，劉光中，馬煜南。酶免疫檢測HBeAg假陽性原因分析。臨床檢驗雜志，2000，18：263. 3 騰龍，陳鋼，洪加林。酶免疫競爭一步法檢測乙型肝炎病毒抗-HBe影響因素探討。中華醫學檢驗雜志，2003，26：111. 4 黃云英，劉瑜。建立乙肝免疫五項無效試劑。臨床二級評價方案的探討。現代醫學檢驗雜志，2002，17：30-32. |
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