| 小鼠活體成像實驗主要實驗項目服務 |
| 序號 |
服務項目 |
具體描述 |
單價(元) |
實驗周期 |
備注 |
| 1 |
Luciferase標記的穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株構建 |
先將要使用的腫瘤細胞用熒光素酶基因標記，抗性可選puromycin和blasticidin兩種 |
3500 |
2-3周 |
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| 2 |
過表達某個基因慢病毒載體構建 |
構建進帶有與步驟1中不同抗性篩選的載體，wb檢測基因表達情況 |
1500以上 |
1-4周 |
價格和試驗周期需要由基因大小來決定 |
| 3 |
敲減某個基因慢病毒載體構建 |
構建進帶有與步驟1中不同抗性篩選的載體，qPCR檢測基因敲減情況，一般選做3-4個靶點 |
2800 |
1-2周 |
確保至少一條shRNA敲減效率達到70%以上 |
| 4 |
過表達或敲減慢病毒包裝 |
HEK293T中共轉(zhuǎn)目的基因質(zhì)粒和病毒包裝質(zhì)粒(psPAX2/pMD2.G),48/72小時后收取病毒上清 |
2000 |
1周 |
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| 5 |
過表達或敲減慢病毒感染腫瘤細胞株 |
病毒上清與polybrene混合，感染腫瘤細胞48-72小時 |
1000 |
2-4天 |
用第1步驟中的標記Luciferase細胞進行該步感染實驗 |
| 6 |
穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株篩選 |
適量濃度的puromycin或blasticidin篩選4-6天，存活的細胞繼續(xù)培養(yǎng)擴增 |
3000 |
6-10天 |
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| 7 |
穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株結(jié)果驗證 |
WB或qPCR驗證過表達與敲減情況，同時驗證熒光素酶活性 |
500 |
2-3天 |
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| 8 |
裸鼠購買 |
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200元/只 |
1周 |
一般每組6-10只 |
| 9 |
裸鼠飼養(yǎng) |
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10元/只/天 |
4-6周 |
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| 10 |
腫瘤細胞尾靜脈注射 |
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80元/只 |
1天 |
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| 11 |
腫瘤細胞原位注射 |
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50-150元/只 |
1天 |
價格根據(jù)原位操作難度來定 |
| 12 |
活體成像檢測 |
裸鼠麻醉，底物熒光素酶注射，儀器檢測熒光強度 |
80元/只/次 |
7天/次 |
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| 13 |
結(jié)果分析 |
熒光強度分析比較 |
300元 |
1周 |
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| 14 |
裸鼠解剖，組織保存 |
取出肺，淋巴結(jié)，肝臟等可能會有轉(zhuǎn)移的組織，福爾馬林及液氮保存 |
30元/只 |
1天 |
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總計（元）
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10-14周 |
/ |
| 說明：2，3步驟按照實驗具體情況可選擇其一來做，后續(xù)如果需要做IHC或H&E，另外收費，其它條件按照客戶特殊實驗要求來協(xié)商定價 |
北京畢特博生物技術有限責任公司
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